Conforme mencionado anteriormente, uma autoclave é igual a uma panela de pressão. A diferença é que a ação do
autoclave é mais grave.
Os instrumentos a serem esterilizados são armazenados na câmara localizada no interior da autoclave. Assim que a autoclave é ligada, uma densa nuvem de vapor é enviada para dentro da câmara. Neste ponto, a pressão e a temperatura começam a aumentar. Normalmente, a maioria das autoclaves deseja manter uma temperatura de cerca de 120°C (cerca de 250°F).
O dispositivo também inclui uma série de válvulas e tubulações para permitir que o vapor entre na câmara e direcione o ar contaminado para a saída. Além disso, não é necessário aplicar uma combinação específica de 120°C e 15 minutos. Diferentes combinações são usadas dependendo do material interior.
Por exemplo, sabe-se que as autoclaves aplicam uma temperatura de 134-138°C durante 3 minutos. Da mesma forma, outras combinações adequadas também podem ser utilizadas.
Estas condições são mantidas durante cerca de 15 minutos, o que é suficiente para matar todos os microrganismos e todos os esporos. O processo destrói o interior do micróbio e efetivamente encerra sua existência. Após o tempo necessário, o vapor é retirado e a pressão é reduzida gradativamente.
O processo baseia-se em deslocar o ar contaminado da câmara com vapor saturado e forçar a persistência desse vapor, de modo que o tempo de exposição prolongado garanta uma esterilidade eficaz. É importante observar que o vapor não está muito quente nem contém mais de 5% de umidade.